Mutaciones en genes Ha-ras y p53 detectadas mediante PCR-SSCP en lesiones premalignas y malignas de cuello uterino asociadas con virus papiloma humano (HPV) / Ha-ras and p53 gene mutations scanned by PCR-SSCP in premalignant and malignant lesions of the uterine cervix associated with human papillomavirus

El objetivo del estudio fue investigar las frecuencias de virus papiloma humano (HPV) y de mutaciones en los genes Ha-ras y el supresor p53 en tumores y lesiones precursoras de cérvix. Se incluyeron en el estudio 30 carcinomas invasores (CAIN), 36 displasias severas (CIN III) y 12 tejidos normales adyacentes a los tumores (TN). Se realizó la tipificación de HPV y la búsqueda de mutaciones en los genes Ha-ras y p 53 mediante PCR-SSCP. Los CAIN fueron HPV positivos en el 93%; en el 41% se observaron mutaciones en Ha-ras y en el 17% para p53. El 80% de los CIN III fue HPV positivo, en el 18% se detectaron mutaciones en Ha-ras y en el 11% en p53. En los TN el HPV se detectó en el 17% de los casos. Todas las mutaciones fueron heterocigotas. Por otro lado, todas las muestras con mutaciones en Ha-ras resultaron HPV positivas, en cambio el 33% de los casos de p53 mutada fueron HPV negativos. El HPV 16 (44%) fue más prevalente que el HPV 18 (15%); los casos de tipo viral no determinado (18%), indicarían la circulación en nuestro país, de otros tipos distintos a los ensayados (6, 11, 16, 18, 31 y 33), variantes o infecciones mixtas. La baja frecuencia de mutaciones en el gen p53 señala que la inactivación de la proteína normal mediada por HPV tendría un rol más importante en la patogénesis del cáncer. Dado que el Ha-ras mutado se halló en lesiones premalignas, hemos especulado que podría representar un marcador temprano de progresión. Nuestros hallazgos proveen de evidencias adicionales acerca de un efecto interactivo entre los HPV de alto riesgo y de oncogenes en el desarrollo tumoral.

Variantes moleculares de virus papiloma humano (HPV) tipos 16 y 18 en adenocarcinomas de cervix / Molecular variants of human papillomavirus (HPV) types 16 and 18 in adenocarcinomas of the cervix

Los virus Papiloma humano (HPV), en particular los tipos 16 y 18, son considerados carcinógenos humanos, habiéndose demostrado una asociación etiológica entre la infección con estos virus y el desarrollo del cáncer de cuello uterino. El rol viral en el carcinoma escamoso ha sido ampliamente estudiado aunque la información disponible en relación al adenocarcinoma es mucho menor, en parte debido a su baja frecuencia. En este trabajo investigamos la presencia de tipos y variantes intratípicas de HPV en adenocarcinomas de cérvix. Se incluyeron 23 biopsias de archivo, fijadas y embebidas en parafina. La detección y tipificación viral se llevó a cabo mediante PCR genérica y posterior análisis de polimorfismos conformacionales de cadena simple (SSCP). La variabilidad genética se investigó en un fragmento de 450 pb del gen L1, mediante la secuenciación directa post-PCR. Se detectaron 11 muestras positivas para HPV 16 (9 prototipos y 2 variantes: 1 europea y 1 asiática-americana), 10 para HPV 18 (9 prototipos y 1 variante europea), 1 para HPV 31 y 1 negativa. Se confirmó la asociación de HPV de alto riesgo con esta neoplasia, con una alta prevalencia (43%) de HPV 18 pero sin un predominio sobre los demás tipos virales, como fue publicado previamente. La variabilidad demostrada en epítopes de la proteína L1 originaron cambios aminoacídicos que podrían tener implicancias en la repuesta inmune y por lo tanto ser considerados en el diseño de vacunas.